标记基因,基因导入质粒为什么质粒中要有两个标记的抗性基因
标记基因,基因导入质粒为什么质粒中要有两个标记的抗性基因?
为了检测目的基因是否成功导入 。
假若标记了X霉素的抗性基因 ,那么质粒成功导入的个体中就应该能抗X霉素 。在X霉素的环境下培养, 生存下来的就是成功导入质粒的。 这样就能筛选出来成功导入质粒的个体 ,毕竟成功导入质粒的个体并整合的是少数。两个标记基因是为了提高筛选的准确性。
通常用什么做标记基因?
楼上这扯淡的来。。
基因标记的选择要看具体的研究目的,理论上任何DNA片段,甚至不是基因,都可以作为标记。比如亲子鉴定的时候可以用STR,物种鉴定的时候可以用功能基因,主要是依据序列的保守性来选择。保守性低的可以用于区别群体甚至个体差异,保守性高的可以用来区别物种甚至门类。
为什么基因工程载体要放两个标记基因?
基因工程中最好有多个标记基因,避免有的标记基因里有限制酶 切点而导致不能使用该标记基因。作用是便于筛选的,就是检测目的基因是否进入受体细胞基因工程中标记基因必不可少,基因工程的核心步骤,构建基因表达载体,中用标记基因检测重组质粒是否已经导入受体细胞中,从而区分己导入细胞和未导入细胞。标记基因和目的基因是连在一起的吗?
标记基因和目的基因是连在一起的。
用标记基因筛选基因载体的方法很简单,在表达载体上一般有两个甚至两个以上的标记基因,比如,一个是抗青霉素的基因,一个是抗四环素的基因,将目的基因插入到抗四环素的基因中,那这个表达载体就不能表达出抗四环素的性状了,只能表达出抗青霉素的性状。然后,将表达载体放在含青霉素的培养基上培养,那么,凡是含有表达载体的就能存活下来。
然后将这些能抗抗青霉素的菌落放在含四环素的培养基上,不能存活下来的就是我们所需要的。
具体方法是印章法。也就是用一块无菌的增绒布,在含青霉素的培养上印一下,接种到含四环素的培养上,如果那个菌落不能生长,那就是我们所需要的,然后从含青霉素的培养基中选择。
为什么基因工程的运载体必须有标记基因比?
基因工程的最终目的是要在植物或动物体内表达该带白的,而不仅仅是只在大肠杆菌里进行表达.固然在大肠杆菌里标记基因是没有作用,但一旦把该基因转化进入了植物或动物,你就会发现检测起来非常困难,而且很难对该基因的表达定位.
为了便于观察和检测,我们引入标记基因,比如,我们看某个蛋白的组织表达特异性(比如只在根,或叶,或花中表达),那么如果加入了标记基因如GFP(绿色荧光蛋白,有该基因的位置在紫外下看到是绿色),或者GUS(经组织化学染色后,有标记基因的组织就有蓝色反应),这样你可以很容易检测到你的蛋白是否表达,表达在哪里,表达强度如何.
总之,加入标记基因有着特殊的作用,绝不是可有可无的.