质粒转化,质粒pcr的结果是线性还是环状

2023-03-30 04:55:03 98阅读

质粒转化,质粒pcr的结果是线性还是环状?

结果是线性的。

线性的,pcr的过程就是从一端到另一端,两端的磷酸二酯键没有酶将其连接成环状。

质粒转化,质粒pcr的结果是线性还是环状

PCR不能获得环状质粒,PCR只能获得DNA片断。要想复制环状质粒,可通过微生物。如将质粒转化入大肠杆菌中,大肠杆菌大量繁殖,再提质粒即可获得。

质粒的转换的方法有哪些?

转化的方法:最常用的是感受态法,包括热激和电转化等,转染不是转化,这是不同的概念。

转化后,可以根据质粒上带有的某种特殊基因的表达来鉴定菌落,最常用的有:抗药性基因的表达,比如质粒带有氨苄抗性基因,能在AMP平板上长的一般可以初步判断为转化成功的菌;还有就是显色筛选,比如质粒上的LacZ基因表达,间接促使添加了X-gal的培养基变蓝,绿色荧光蛋白基因表达后菌落发荧光等。

求高人解释每条带分别是什么?

质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型)。在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的。在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移率。其中跑在最前沿的是共价闭合DNA,其后依次是线性DNA和开环DNA,其原因是共价闭合的DNA其空间位阻最小,所以跑得最快。而开环DNA空间位阻最大,所以跑得最慢。

不过并不是每次提取的质粒都有三条带,两条带的情况也很多见,如你的空质粒。

质粒是如何进入真核细胞的?

一般细菌,即原核生物质粒在自然状态下很难进入真核细胞内。 要将质粒转入真核细胞需要一定的技术手段才能实验。 请注意,在肺炎双球菌转化实验中,是死亡的S型菌株的DNA片段进入到了R型菌内使R型菌转化为S型菌而致病。单纯的DNA片段不能引起疾病,而需要完整的S型活菌才能致病。

以质粒为载体重组体进入宿主菌的过程称为什么?

这个过程是转化,如果是进入细胞叫转染

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